جداسازی و تعیین هویت باسیلوسهااز برخی نقاط خلیج فارس و بررسی تولید لیپاز توسط آنها

یکی از بزرگترین اکوسیستم های موجود بر روی کره زمین اکوسیستم های آبی است ارگانیسمهای کوچکی از جمله: قارچها، ویروسها و باکتریها از ساکنین اصلی این اکوسیستم ها هستند .خلیج فارس یکی از چندین اکوسیستم آبی موجود است که تنوع میکروبی قابل توجهی دارد.باکتریهای موجود در این اکوسیستم تولیدات مختلفی از جمله انواع آنزیمها، آنتی بیوتیکهاو...دارند.یکی از این تولیدات مهم آنزیم لیپاز است که توسط جنسهای مختلف باکتریایی ساکن در خلیج فارس تولید میشود.باسیلوسها یکی از بهترین تولید کنندگان این آنزیم هستند.هدف از انجام تحقیق حاضر جداسازی باسیلوسها از مناطقی از خلیج فارس و بررسی توانایی تولید لیپاز آنها بوده است.پس از نمونه گیری از آبهای سطحی،عمق و رسوبات در سه منطقه بندر هندیجان،بندر امام خمینی و سواحل قشم نمونه ها به آزمایشگاه منتقل شدند.با قرار گرفتن نمونه ها در 80 درجه سانتیگراد به مدت 10 دقیقه وسپس تلقیح آنها به محیط مارین براث آماده سازی و غنی سازی انجام گرفت.باکشت بر روی محیط مارین آگار، انجام پاساژهای متوالی و مشاهده تک کلنی ها جداسازی سویه های باکتریایی مختلف از نمونه ها انجام شد.تک کلنی های بدست آمده به محیط سنتزی k منتقل شد و کلنی های رشد کرده روی این محیط زیر میکروسکوپ بررسی شد و باسیلهای گرم مثبت مشاهده شدند.برای غربالگری باکتریهای مولد لیپاز از محیط رودامینb لیپاز آگار استفاده شد.در این محیط روغن زیتون به عنوان سوبسترا و رودامینb به عنوان نشانگر وجود داشت.با استفاده از این محیط 8 سویه که بهترین تولید لیپاز را داشتند انتخاب شد.با استفاده از روش تیتراسیون فعالیت آنزیمی 8 سویه منتخب در محیط تولید لیپاز(حاوی روغن زیتون،عصاره مخمر و پپتون)با 7ph= و دمای 37 درجه سانتیگراد هر 24 ساعت یکبار طی 6 روز انکوباسیون اندازه گیری شد.حداکثر فعالیت آنزیمی 3 سویه در روز پنجم،یک سویه در روز چهارم و 2 سویه در روز سوم مشاهده شد.